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介紹和解釋實驗室儀器的工作原理、操作步驟、維護保養、技術規范、應用案例等內容
研究摘要
副溶血弧菌是導致食用海鮮后胃腸炎爆發的主要致病菌之一。環二鳥苷酸(c-di-GMP)是廣泛存在于細菌中的第二信使,可控制多種細菌行為,包括致病機制、生物膜的形成和運動能力。而GefB蛋白(VPA1478)以存在GGDEF結構域為特征,可抑制副溶血弧菌的群集運動能力。研究發現,刪除了GefB基因的副溶血弧菌產生了一系列的顯著變化:c-di-GMP水平下降,生物膜形成減少,而游泳和群集運動能力卻得到了增強。進一步研究發現,GefB不僅參與了鞭毛相關基因的抑制,還激活了那些負責胞外多糖產生的基因。值得注意的是,GefB與其相鄰基因VPA1477共同構成一個名為vpa1477-gefB的轉錄單元,并且這個單元受到兩種群體感應調節劑AphA和OpaR的協同控制。具體來說,在細菌細胞密度較低的情況下,AphA會促進vpa1477-gefB的表達;而在高細胞密度條件下,OpaR則起到抑制作用。這一系列研究成果為我們深入理解副溶血弧菌內部復雜的c-di-GMP代謝網絡及其調控機制提供了寶貴的線索。
MGC系列微生物生長曲線分析儀的應用
為了確定GefB基因缺失是否會對副溶血弧菌的生長產生影響,研究人員使用了MGC-200微生物生長曲線分析儀進行實驗。
實驗中,副溶血弧菌RIMD2210633在心浸液肉湯中培養至OD600達到1.4,然后將該菌液作為種子菌液,以1:1000的比例接種到心浸液肉湯或者海生菌肉湯中,然后分裝到96孔細胞培養板,每孔含有200μL菌懸液,每個菌株設置12個生物學重復,37℃培養。MGC-200每30分鐘自動檢測一次OD600值,以監測細菌的生長情況。
研究發現無論在下心浸液肉湯(圖A)還是在海生菌肉湯(圖B)中,野生型(WT)和GefB基因缺失(ΔgefB)的副溶血弧菌的生長率沒有明顯差異,這表明GefB基因的缺失不會直接影響副溶血弧菌的基本生長特性。
結論
MGC系列微生物生長曲線分析儀具有氣體環境監控、高通量培養、全自動檢測以及實時顯示生長曲線等的功能,整個過程無需人工頻繁取樣,也無需人員值守,大大降低了污染風險,真正實現了人力的解放和研究效率的提升,將成為您科研路上的得力助手。
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