美女让男人操 I aa片在线观看无码免费 I 亚洲a人 I 亚洲 欧美 中文 日韩aⅴ手机版 I 亚洲午夜激情影院 I 精品无人国产偷自产在线 I 免费无遮挡很爽很污很黄的网站 I 久草在线综合 I 97视频资源 I 欧美日韩精品无码一本二本三本色 I 国产丰满美女做爰 I 欧美激情视频网址 I 黑人大长吊大战中国人妻 I 2019av在线视频 I 国产啪精品视频网站免费 I 国产精品国一国二在线 I 岛国视频一区 I 女人张开腿让男人桶爽 I 久久久久久久久久久视频 I 久久综合日本 I 国产欧美一区二区精品老汉影院 I 伊人精品在线视频 I 双性皇帝龙椅腿合不拢h I 精品在线观看视频 I 午夜影院一区二区三区 I 人人射人人爽 I 亚欧洲在线视频 I 精品久久久久久无码中文字幕一区 I 国产对白刺激真实精品91 I 免费国产女王调教在线视频 I 视频一区二区中文字幕 I 国产视频 视频一区 I 狠狠干人人干 I 日韩国产欧美区 I 美女被狂躁免费网站

股票代碼

430685

當前位置: 應用案例 > 正文

研磨儀與分散儀在蛋白表達水平檢測方面的應用

發布時間:2024-11-01 來源:新芝生物 瀏覽量:0
分享:
掃碼分享

實驗目的

  為了解大鼠肺組織中炎癥因子蛋白表達情況,需要將組織內的蛋白盡量釋放并收集,使用研磨和超聲手段,對肺組織進行勻漿和細胞破碎,最終分離得到溶液中的蛋白進行WB實驗,從而了解蛋白表達情況。

實驗步驟

  取0.2 g大鼠右肺組織樣本,切碎,取適量溶解并混勻后的RIPA裂解液,使用前加入酶抑制劑,在每100 mg右肺組織樣本內加入 1 mL 的RIPA裂解液,后使用SCIENTZ-24高通量組織研磨器將組織充分研磨勻漿,于4℃的條件下裂解 30~60 min,將裂解后的組織置于SCIENTZ-1500F超聲分散儀上破碎,用高速離心機10000 r/min 離心10 min,取上清液。提取總蛋白并利用BCA試劑盒測定總蛋白濃度,于100℃水中煮5 min,使蛋白變性后,置于冰上使其驟冷,提取為實驗使用的蛋白樣本,置于-20℃冰箱中冷凍保存。使用蒸餾水清洗干凈灌膠玻璃板,豎直放置使其自然晾干。分別使用分離膠、5%濃縮膠處理后,將凝膠置于電泳槽進行電泳,電泳結束后將蛋白轉移到預先準備的 NC 膜上,制備轉膜“三明治”,在電轉儀中轉膜結束后,搖床洗膜,封閉液封閉1~2 h倒掉封閉液,加入稀釋的相應抗體。在搖床上4℃ 過夜,TBS-T洗膜3次,每次10 min,加入二抗。二抗孵育結束后,于搖床上用TBST洗膜5~10 min ×3次。加ECL工作液于印跡膜上30~60 s,吸干發光液,置印跡膜于成像分析儀自動成像,軟件ImageJ分析蛋白條帶灰度值。

實驗結果

  各組大鼠肺組織中IL-17、IL-22、IL-10、IL-35蛋白表達情況比較與空白組比較,模型組和假 貼組肺組織中 IL-17、IL-22蛋白相對表達量均明顯升高(P均<0.05),IL-10、IL-35蛋白相對表 達量均明顯降低(P均<0.05) ; 與模型組和假貼組比較,地塞米松組、發酵組、非發酵組肺組織中IL-17、IL-22蛋白相對表達量均明顯降低(P均<0. 05),IL-10、IL-35蛋白相對表達量均明顯升高( P均<0.05) ; 地塞米松組、發酵組、非發酵組間各指標比較差異均無統計學意義( P均>0.05)。

實驗結果

實驗結果

電話

24小時服務熱線 18106650612

返回 頂部