外用半固體制劑包括乳膏劑、軟膏劑和凝膠劑等。藥物活性成分(active pharmaceutical ingredient，API)的釋放對于外用半固體制劑的質量影響至關重要，藥物釋放在很大程度上取決于其配方組成和制備過程。體外釋放試驗(in vitro release test，IVRT)可用來評估 API 的釋放速率，檢測由于制劑變化或API理化性質的差異而可能引起的釋放速率之間的不同。

甲硝唑是一種抗生素和抗原蟲劑，用于治療或預防厭氧菌引起的系統或局部感染，而甲硝唑凝膠半固體制劑則主要用于炎癥性丘疹、膿皰瘡、酒渣鼻紅斑的局部治療。

本次實驗我們采用了新芝生物TDS-1012全自動透皮擴散取樣系統（簡稱：TDS-1012）設備對甲硝唑凝膠的體外釋放進行研究。

實驗目的

01   檢測720min時間內甲硝唑累計擴散量

02   檢測TDS-1012的擴散曲線的一致性

實驗方法

 實驗步驟

對照品儲備溶液制備

精密稱取甲硝唑對照品59.61mg至10ml容量瓶中，用50%的甲醇水溶液溶解并稀釋至刻度，制成濃度為5.961mg/ml的對照品儲備溶液。

配置標準曲線點

將5.961mg/ml甲硝唑對照品儲備液用0.9%生理鹽水稀釋制成濃度分別為29.81μg/ml、59.61μg/ml、119.2μg/ml、238.4μg/ml、298.1μg/ml。

供試品配制

（1）取經生理鹽水浸泡30min左右的尼龍膜（25mm），將2mm厚度的定量環至于其上，用滴管吸取甲硝唑凝膠適量（約0.37g），共10組，精密稱定后將其至于擴散池上固定。

（2）取樣時間為15、30、45、60、75、90、120、180、240、300、360、420、480、540、600、720min，共16個時間點。

   說明：根據藥物服用指南：早晚各一次涂抹，故選擇研究該藥物12小時內釋放情況。

 全自動擴散取樣系統參數（TDS-1012）

擴散池：定量環內孔徑為15mm（膜面積1.76625cm2）；擴散池體積12ml

藥品：尼美欣（批號240203）

接受介質：生理鹽水

溫度：32℃±0.5

轉速：400rpm

 色譜條件

儀器：Aglient 1260 Infinity II

色譜柱：Extend- C18( 460x 250nm, 5μm)

檢測器：DAD

波長：254nm

流速：1.0 ml/min

進樣量：20μL

柱溫：30℃

實驗結果

 甲硝唑對照品標準曲線

圖1  甲硝唑標準曲線圖

 甲硝唑凝膠累計擴散量

表2  不同時間點的檢測峰面積

說明：根據Y=67.521x-23.047線性方程計算出每個時間點的擴散濃度（x：濃度 μg/mL；y：峰面積），然后再根據Qn =(VCn+∑-1V C?)/A公式計算累積透過量（mg/cm2）；其中V為接收室中接收液的體積，Vi為i時間段接收室中取出接收液的體積。Cn為第n個取樣時間點測得的接收液中藥物濃度，A為藥物有效擴散面積（1.76625），Ci表示第i個取樣時間點測得的接收液中藥物濃度。

表3  不同時間段的累計擴散量

 甲硝唑凝膠累計擴散量

圖2  單位面積累計滲透量時間曲線

結論

01   從圖2和表3數據圖可看出，不同擴散池中甲硝唑凝膠的單位面積累計擴散量的相對標準偏差（RSD）均在4.0%以內，且隨著時間的推移，RSD穩定在約1.1%。這不僅表明滲透擴散的精密度非常好，也反映了儀器的穩定性。

02   按甲硝唑標示量計（5g:37.5mg），720min的平均擴散量為2.6610mg，累計擴散量為標示量的95.89%，結果反映了TDS-1012儀器在凝膠劑上能夠有效地測定藥物的擴散特性，從而為藥物釋放研究提供可靠的數據支持。

全自動透皮擴散取樣系統